TubulinTracker
チューブリン阻害剤の評価

TubulinTrackerは、哺乳類細胞における微小管形成への被験物質の影響を評価するための独自のin vitroアッセイです。Tubulin-GFP発現のセルラインに基づいたこのアッセイは、チューブリン脱重合及び重合の阻害剤(微小管の安定化剤と不安定化剤)を判別することが可能であり、異数性を誘発する化合物等のメカニズムの解明に役立ちます。

In vitroまたはin vivoの小核試験やToxTrackerACE試験から、異数性誘発物質の可能性を示唆された遺伝毒性化合物について、TubulinTrackerは開発継続の根拠となる支援データを提供することができます。異数性は、微小管動態への干渉やオーロラキナーゼの阻害など、複数のメカニズムを介して生じ、毒物学的懸念の閾値(TTC:Threshold of Toxicological Concern)を伴うメカニズムと見なされています。したがって、非DNA反応性のメカニズムを実証することにより、遺伝毒性化合物の開発を継続できる可能性があります。そこで、TubulinTrackerは、微小管動態への干渉のメカニズムを同定し、阻害剤の種類を特定することに役立ちます。※ オーロラキナーゼ阻害の評価も行っています。詳細はお問い合わせください。

TubulinTracker Cell Line

TubulinTrackerに使用するTubulin-GFP発現セルライン。被験物質への曝露4時間後の様子。A:溶媒(DMSO)、B:チューブリン脱重合の阻害剤、C:チューブリン重合の阻害剤。

TubulinTracker-validation

TubulinTrackerがチューブリン重合阻害剤を正確に同定する能力は、既知の遺伝毒性メカニズムを有する参照化合物のパネルを用いて検証されています。 このパネルには、チューブリン重合・脱重合の阻害剤、その他の異数性誘発物質、染色体異常誘発物質、タンパク質フォールディング阻害剤及び非遺伝毒性化合物が含まれています。

Tubulin-GFP細胞を、各々の参照化合物の10濃度に4時間曝露しました。 重合チューブリンの量は、フローサイトメトリーにより各濃度で測定し、用量反応曲線の曲線下面積(AUC)を計算することにより定量しました。 相対AUCが2以上の化合物は、微小管安定化剤(Tubulin stabilizer)、相対AUCが0.5以下の化合物は微小管不安定化剤(Tubulin destabilizer)として分類されました。 オーロラキナーゼ阻害剤など、微小管の安定性に影響を及ぼさなかった参照化合物はすべて、約1の相対AUC(黒い点線)をもたらしました。

TubulinTrackerは、Toxys B.V.社の施設(オランダ)にて受託試験サービスとして提供しています。

  • 被験物質の必要量:3~10mg
  • 可能な溶媒:水、DMSO、PBSなど
  • 納期:3週間程度

Toxys B.V.社は、新規物質の安全性評価に特化しており、遺伝毒性および生殖毒性のメカニズムについての情報を得るための一連の独自および標準技術を提供しています。同社の専門研究者は、試験計画等についてもご支援いたします。詳しい情報については、当社までお問い合わせください。

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