単球活性化試験 （MAT）

特徴

試験の仕組み

1. 被験物質を、ヒト単核細胞（PBMC）と一緒に20時間培養します。被験物質に含まれている発熱性物質は単球細胞に刺激を与え、培地へのインターロイキン6（IL6）放出を促進します。培養終了後にELISA法を用いて培養上清液のIL6濃度を測定します。
2. CTL-MAT キットを用いた、EDQM（欧州医薬品品質部門） の標準エンドトキシン（LPS）に対する用量反応曲線データです。欧州薬局方の規制に従って、各条件を4回で実施しました。これらの結果は、キットのバラつきが少なく、感度が高いことを示しています。詳細な検証については、次の論文をご参照ください：An improved monocyte activation test using cryopreserved pooled human mononuclear cells. Shabnam Solati et al. Innate Immun. 2015 Oct;21(7):677-84.

従来試験法との比較

比較項目		MAT（PBMC）	MAT（細胞株）	LAL法	RTP法
薬事関係	EP 2.6.30準拠	◎	×	×	×
検出可能な 発熱性物質	全てのヒト発熱性物質	◎	×	×	×
	エンドトキシン (ET)	◎	〇	◎	△
	非ET発熱性物質	◎	×	×	△
	ウイルス、酵母、カビ	◎	×	×	〇
アッセイ性能	再現性	◎	×	〇	〇
	感度 (EU/ml)	0.004	0.05	0.005	0.5
	定量性	◎	◎	◎	×
	時間・費用効果	◎	×	◎	×

再現性

同一のPBMCロット（A）または異なったPBMCロット（B）からバイアルをランダムに選択し、EDQM（欧州医薬品品質部門）の標準エンドトキシン（LPS）に対する用量反応曲線を作製したデータです。この結果は、キットに用いる細胞のロット内及びロット間の再現性が優れていることを示しています。

製品情報

製品一覧
商品番号	分類	商品名	内容	保存
CTL-MAT-001	キット	MAT-Test Kit (4 donor pool)	以下参照	以下参照
CTL-MAT-002	キット	MAT-Test Kit (8 donor pool)	以下参照	以下参照
CTL-MAT-PE4	PBMCのみ	MAT-PBMC, 4 donor pool	5 x 106個	-150℃１
CTL-MAT-PE8	PBMCのみ	MAT-PBMC, 8 donor pool	5 x 106個	-150℃１
CTL-MAT-PE1	PBMCのみ	MAT-PBMC, 1 donor pool	5 x 106個	-150℃１

 

キット内容

部品	項目	単位	保管
A	96 well plate	Plate x 1	RT
B	IL-6 ELISA kit	Reagents x 1 set	+4℃
C	Medium A	1.8ml x 1 vial	-20℃
	Medium B	50ml x 1 bottle	-20℃
	EDQM LPS	2,000 EU/ml x 50uL	-80℃
D	PBMCs	1 vial	-150℃１

1: 長期保存の場合。-80℃で3カ月保存可能です。

キットには、標準エンドトキシンを含めて、単球活性化試験に必要な試薬が全て含まれています。1キットで2種類の被験物質が測定可能です。複数のキットを同時に使用する場合、2つ目以上のキットはコントロールをおく必要がないため、1キットにつき３種類の被験物質が測定可能です。

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